色譜法
chromatography
定義:基于不同物質在流動相和固定相之間的分配系數不同而將混合組分分離的技術。當流動相(液體或氣體)流經固定相(多孔的固體或覆蓋在固體支持物上的液體)時,各組分沿固定相移動的速度不同而分離。能用于微量樣品的分析和大量樣品的純化制備。
學科:藥學_生物藥學
相關名詞:分配系數 固定相 流動相
圖片來源:視覺中國
【延伸閱讀】
色譜法又稱層析法,1906年由俄國植物學家哈伊爾·茨維特首創。色譜法是分離、提純和鑒別有機化合物的重要方法之一。早期用此法來分離有色物質時,往往得到顏色不同的色層,色譜一詞由此得名。現在被分離的物質無論是否有顏色,均適用。色譜法與重結晶、升華、萃取和蒸餾等傳統的分離提純手段相比,具有微量、快速、簡便、高效的優點。
色譜法按固定相或流動相的物理狀態可分為液-固色譜、氣-固色譜、氣-液色譜、液-液色譜等;按操作形式不同可分為柱色譜、薄層色譜、紙色譜、氣相色譜和高效液相色譜等類型;按分離原理可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜和排阻色譜等。
色譜法的基本原理是利用混合物各組分在不相混溶的兩相中分配系數的不同、吸附與解吸附能力的不同、滲透能力的不同或其他親和作用性能的差異將各組分分開:
1.吸附色譜是由于被分離混合物的各組分被固定相吸附能力不同,當流動相流經固定相時,吸附力弱的組分隨流動相迅速向前移動,吸附力強的組分滯留在后,由于各組分具有不同的移動速率,最終得以分離。
2.分配色譜是根據化合物在兩種互不相溶的溶劑中的溶解度或分配系數的不同而進行分離。
3.空間排阻色譜所用的固定相是多孔性填料,稱為凝膠,故又稱凝膠色譜法或分子排阻色譜法。
4.離子交換色譜是一種固定相為離子交換樹脂的液相色譜,按樹脂可交換離子的電荷符號,分為陽離子交換樹脂和陰離子交換樹脂兩類,所用流動相是以水為溶劑的緩沖溶液,被分離的物質是離子型的有機物或無機物。
色譜法主要用于:
1.分離混合物。含有多種組分的混合物樣品,尤其是某些結構及理化性質相似的化合物混在一起時,很難用化學方法分離,采用色譜分離,常常可以達到有效分離的目的,某些有機同系物及同分異構體亦可得以分離。
2.精制、提純有機化合物。有機化合物中含有少量結構類似的雜質不易除去時,可利用色譜法進行分離,獲得純品。
3.鑒定化合物。利用已知標準樣品進行對照,借助于色譜法可以檢驗化合物的純度或者將未知物與已知物進行對照,初步判斷性質相似的化合物是否為同一種物質。
4.觀察有機化學反應進行的程度。利用簡便、快速的薄層色譜法觀察色點的變化,以判斷反應是否完成。
(延伸閱讀作者:吉林農業大學資源與環境學院 洪波教授)
責任編輯:張鵬輝